Elucidating the role of unzipped in the visual system of Drosophila

Tez KünyeDurumu
Elucidating the role of unzipped in the visual system of Drosophila / Unzipped genı̇nı̇n Drosophila göz sı̇stemı̇ndekı̇ rolü
Yazar:ECE TERZİOĞLU KARA
Danışman: DOÇ. DR. ARZU ÇELİK FUSS
Yer Bilgisi: Boğaziçi Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Konu:Biyoloji = Biology ; Genetik = Genetics
Dizin:
Onaylandı
Doktora
İngilizce
2015
173 s.
Drosophila gözü, herbiri sekiz fotoreseptör içeren 800 adet birimden oluşur. R1- R6 dış fotoreseptörleri Rhosopsin1’i (Rh1) ifade edip hareketi algılarlarken, R7 ve R8 iç fotoreseptörleri Rh3-Rh6’yı ifade edip renklerin algılanması sağlarlar. İfade edilen Rh molekülüne göre R7 ve R8 hücreleri alt gruplara ayrılmaktadır. Rh4’ü ifade eden R7 ile Rh6’yı ifade eden R8 çifti ‘sarı’ altgrubu oluştururken, Rh3’ü ifade eden R7 ile Rh5’i ifade eden R8 çifti ‘soluk’ altgrubu oluşturur. PR’lerin farklılaşma süreci, üçüncül instar larva aşamasında başlar ve iki aşamada tamamlanır. İlk aşamada PR hücrelerinin farklılaşması başlar ve aksonları beyinde geçiçi katmanlarına yönelir. İkinci aşamada, içteki ve dıştaki PR’ler birbirlerinden ayrılırlar, her PR bir Rh molekülü ifade eder ve aksonlar optic lobda gitmeleri gereken katmanlarına uzanırlar. Bu çalışmanın amacı, daha önceden gerçekleştirilmiş olan yükseltici taraması baz alınarak iç fotoreseptörlere, özellikle de R8 hücreleri üzerine odaklanarak, iç PR’lerin farklılaşmasında görevli yeni molekülleri ve yolakları bulmaktı. Yükseltici taramasında bulunan ve R8 PR’ında ifade edilen üç aday genden unzipped geni bir hücre yüzey molekülü olması sebebiyle daha detaylı analiz yapmak üzere seçildi. İmmünoboyamalar ile ortaya çıkan ifade örüntüsüne göre Uzip üçüncül instar larva safhasında R8 hücrelerinde ve glia hücrelerinin bir alt grubunda, 48 saat pupa safhasında R8 hücrelerinde ve yetişkin safhada da bir kısmı medullaya uzanan alt grupta olmak üzere glia hücrelerinde ifade edilmekte. Yine yapılan immünoboyamalara göre Uzip üçüncü instar ve pupa aşamasında PR oluşumu ve glia ifadesinde, yetişkin safhasında da Rh ifadesine bağlı altgrup özelleşmesinde direkt bir etkiye sahip değil. Akson yönelmesinde ise Uzip hedef bölgedeki glialarda baskılandığı ve normalde ifade edilmeyen komşu fotoreseptörlerle farklı glialarda ifade edildiği zaman, akson projeksiyonlarında sapma görüldü. Bu çalışma sonucunda öngördüğümüz modele göre Uzip’i ifade eden R8 hücreleri, projeksiyonlarının hedef bölgesinde bulunan Uzip’i ifade eden glia hücrelerinden gelen adhezyon sinyalini takip etmekte. Bu çalışma Unzipped’in görsel sistemdeki ve aksonal uzanımdaki ifadesini ve rolünü göstermektedir.
The Drosophila eye is composed of 800 ommatidial units, each containing eight photoreceptors (PR). The outer PRs R1-R6 are responsible for motion detection, while the inner PRs R7 and R8 and are responsible for colour vision. The outer PRs express Rhodopsin1 (Rh), while the inner PRs express Rh3-Rh6. The pale subtype is formed when the R7 cells express Rh3 and the coupled R8 cells express Rh5, while in the yellow subtype R7 cells express Rh4 and the coupled R8 cells express Rh6. This final state of differentiation is reached after a sequential recruitment process of PRs at the 3rd instar larval stage. At the initial stage, the PR cells start differentiating and their axons target to their temporal layers. At the terminal stage the inner and outer PRs are distinguished from each other, each PR expresses a specicific Rh molecule, and the axons target to their final layers in the optic lobe. The aim of this study was to identify new molecules involved in inner PR differentiation, mainly focusing on three genes expressed in R8 cells that have been identified in a previously performed enhancer-trap screen. One of these genes, unzipped was chosen for further analysis because of its function as cell adhesion molecule (CAM). By immunostainings the expression of Uzip was revealed to be in R8 cells and a subgroup of glial cells at the 3rd instar larval stage, R8 cells and glial cells at the 48 hour pupa stage, and glial cells in the adult stage where some of them project to the medulla. Immunostainings showed that Uzip does not have a direct effect on PR formation and glia expression at the 3rd instar larvae and pupae stages; or on subtype specification at the adult stage. For axonal targeting both the downregulation of Uzip in the target area and the misexpression in neighboring PRs and glia, which are not in the target region, lead to an increase in axonal misprojection phenotype. According to our suggested model, Uzip expressing R8 cells follow the adhesive signal from the Uzip expressing glial cells at the target region of projection. This study identifies Unzipped and describes its expression and involvement in axonal targeting the visual system.

Download: Click here