Dondurulmuş sazan sperma hücrelerinde dna hasarının tek hücre jel elektroforezi (COMET) yöntemi ile belirlenmesi

Tez KünyeDurumu
Dondurulmuş sazan sperma hücrelerinde dna hasarının tek hücre jel elektroforezi (COMET) yöntemi ile belirlenmesi / Detecti̇on of dna damage of frozed carp sperm cells wi̇th si̇ngle cell gel electrophoresi̇s (COMET)
Yazar:NAZLI YILDIRIM
Danışman: DOÇ. DR. FATİH ÖĞRETMEN
Yer Bilgisi: Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Konu:Biyoloji = Biology
Dizin:
Onaylandı
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
52 s.
Spermanın dondurularak uzun süreli muhafazasında ve çözüm sonrası düşük fertilizasyon oranlarının sebeplerinin araştırılması açısından bu çalışma önem taşımaktadır. Araştırmada İzmir DSİ Ürkmez Su Ürünleri Üretim Tesisinden temin edilen balıklar (Cyprinus carpio) kullanılmıştır. Yapılan çalışmada; dondurulmuş sazan balığı spermasının çözüm sonrasında tek hücre jel elektroforezi yöntemi ile DNA hasarı araştırılmıştır. Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi Biyoloji Bölümü Hidrobiyoloji Laboratuvarı’nda, 2-3 yaş arasındaki 3 erkek sazan balığından alınan sperm örnekleri havuzlanarak dondurulmuştur. Numunelerin çözüm sonrası tek hücre jel elektroforezi yöntemi ile DNA hasarı analiz edilmiştir. Comet metodunda hücreler floresan mikroskobunda incelenerek DNA hasarının düzeyi belirlenmiştir. Yapılan analizlerde dondurulmuş sperm DNA’sının ortalama % 31,8±2,8a oranında hasara uğradığı gözlemlenmiştir. Bu çalışmada üç farklı comet tekniği uygulanmıştır. Bu tekniklerden pratik olarak en uygun olanı (Singh vd., 1998) balık spermasına göre optimize edilmiştir. Böylece çalışma prensibi açısından kolay bir yöntem geliştirilmiş olmakla birlikte zamandan ve kullanılan kimyasallardan da tasarruf edilmiştir. Çalışmada kullanılan 3 ayrı metod arasındaki farklar istatiksel olarak incelenerek, varyans analizi (ANOVA) yapılmıştır. Metodlara göre DNA hasarsız ve hasarlı hücre dağılımları incelenmiştir. Gruplar arasında istatiksel olarak farklılık olmadığı belirlenmiştir (P

Download: Click here