İnsan serviko-vajinal epitel hücrelerindeki apopitotik hücresel değişikliklerin sitolojik ve immünositokimyasal yöntemlerle araştırılması

Tez KünyeDurumu
İnsan serviko-vajinal epitel hücrelerindeki apopitotik hücresel değişikliklerin sitolojik ve immünositokimyasal yöntemlerle araştırılması / The investigation of apoptotic cellular changes in human cervico-vaginal epithelial cells by cytological and immunocytochemical methods
Yazar:EMİNE KORKMAZ
Danışman: PROF. DR. ŞAYESTE DEMİREZEN
Yer Bilgisi: Hacettepe Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Konu:Biyoloji = Biology
Dizin:Apoptozis = Apoptosis
Onaylandı
Doktora
Türkçe
2012
121 s.
Bu çalışmada 200 hastaya ait serviko-vajinal yayma örnekleri, epitel hücrelerindeki apopitotik değişiklikleri saptamak amacı ile sitolojik ve immünositokimyasal yöntem kullanılarak incelenmiştir. Sitolojik yöntemde, Papanicolaou ile boyanan yayma örnekleri ışık mikroskobik olarak incelenmiş ve 200 yaymanın 54’ünde (%27) olası apopitotik epitel hücrelerine ve nötrofil lökositlere rastlanmıştır. Daha sonra 200 hastaya ait tüm yayma örnekleri soldurulmuş ve immünositokimyasal bir yöntem olan TUNEL (Terminal deoksi nükleotidil transferaz-mediated dUTP nick end-labeling) yöntemi uygulanmıştır. Soldurulmuş bu 200 yaymanın 38’inde (%19) apopitotik epitel hücrelerine, nötrofil lökositlere, endoservikal hücrelere ve apopitotik cisimcikleri fagosite etmiş olan ve sitoplazmasında pozitif boyanma gösteren makrofajlara rastlanmıştır. Sitolojik yöntemle olası apopitotik olduğu düşünülen ve işaretlenerek soldurulan hücrelerin hiçbiri, immünositokimyasal yöntemle pozitif boyanma göstermemiştir. Bununla birlikte, 16 yaymada (%8), her iki yöntemle de pozitif sonuç veren fakat farklı alanlarda bulunan apopitotik hücrelere rastlanmıştır. Her iki yöntem istatistiksel olarak karşılaştırıldığında ise serviko-vajinal yaymalarda bulunan hücrelerdeki apopitotik değişiklikleri saptamada, sitolojik ve immünositokimyasal yöntem arasında anlamlı bir farklılığın olmadığı ortaya çıkmıştır (p>0.05).Çalışmamızda, sitolojik yöntemle ve TUNEL yöntemiyle apopitotik hücresel değişikliklerin tespit edildiği hastalar klinik dönemlerine göre incelenmiş ve bu hastaların daha çok post partum (doğum sonrası) ve menopoz döneminde oldukları belirlenmiştir. Buna göre post partum dönemi ile iki yıllık ve beş yıllık menopoz döneminde bulunan hastaların yaymalarındaki apopitotik değişiklikleri saptamada sitolojik yöntemin, beş yıldan fazla süredir menopoz döneminde bulunan hastalarda ise TUNEL yönteminin kullanılmasının istatistiksel olarak daha anlamlı olduğu belirlenmiştir (p0.05).In our study, patients having apoptotic cells in their smears stained with both cytological and TUNEL method were also examined according to their clinical findings and it was determined that they were mainly in post partum and menopausal stage. It was understood statistically that while cytological method was more appropriate for detecting apoptotic cells in smears of patients in post partum, two-years menopausal stage and five-years menopausal stage, TUNEL method is more effective to detect apoptotic cells in patients with more than five years menopausal stage (p>0.05). When two methods were compared statistically according to cell types, it was determined that cytological method is more appropriate for detecting of apoptotic changes in epithelial cells and TUNEL method is more appliable in detecting of apoptotic changes in endocervical cells and macrophages (p0.05).According to these results, it was understood that, while it was possible to determine late-phase of apoptosis, in which morphological changes were observable, with cytological method, early-phase of apoptosis is observable with TUNEL method which detects fragmentation in nucleus.In this study, it was concluded that application of both cytological and immunocytochemical methods is would be more effective for detecting of both early and late-phase apoptotic changes in cells undergoing apoptosis in cervico-vaginal smears.

Download: Click here